文章目录

1 材料与方法

1.1 动物

1.2 药物及试剂

1.3 主要仪器

1.4 模型复制、分组及给药

1.5 标本采集、处理

1.6 Scr、BUN、24 h尿蛋白（24 h U-pro）及Cys-C检测

1.7 肾脏组织病理形态学观察

1.8 ELISA法测定血清及肾组织中AngⅡ的含量

1.9 免疫组化法检测肾脏组织中AT1R的表达

1.1 0 WesternBlot法检测肾脏组织中AT1R、p-ERK1/2、ERK1/2蛋白的表达

1.11 Real-time PCR法检测肾脏组织中AngⅡ、AT1R、结缔组织生长因子（CTGF) mRNA的表达

1.12统计学处理方法

2 结果

2.1 PNS对CRF大鼠Scr、BUN、24 h U-pro及Cys-C的影响

2.2 PNS对CRF大鼠血清及肾组织中AngⅡ含量的影响

2.3 PNS对CRF大鼠肾脏组织病理变化的影响

2.4 PNS对CRF大鼠肾组织中AT1R表达的影响

2.5 PNS对CRF大鼠肾组织AT1R、p-ERK1/2、ERK1/2蛋白表达的影响

2.6 PNS对CRF大鼠肾组织中AngⅡ、AT1R、CTGF mRNA表达的影响

3 讨论

文章摘要:目的研究三七总皂苷（PNS）对腺嘌呤诱导的慢性肾衰竭（CRF）大鼠AngⅡ/AT1R/ERK1/2信号通路的影响,探讨其延缓慢性肾衰竭进展的作用机制。方法将65只雄性SD大鼠随机分为正常组10只、造模组55只,正常组常规饲养,造模组采用250 mg·kg^-1·d^-1腺嘌呤混悬液连续灌胃28 d复制CRF大鼠模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、贝那普利组(10 mg·kg^-1)及PNS低、中、高(40、80、160 mg·kg^-1)剂量组,灌胃给药,每日1次,连续28 d。检测大鼠24 h尿蛋白（24 h U-pro）及血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）的含量;采用HE染色法观察肾组织病理形态,Masson染色法观察肾间质纤维化程度;采用ELISA法检测血清及肾组织匀浆中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、血清中胱抑素C（Cys-C）的含量;采用Western Blot法分析肾组织中血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型（AT1R）、细胞外调节激酶（ERK1/2）、磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）蛋白表达情况;Real-time PCR法检测肾组织中AngⅡ、AT1R、结缔组织生长因子（CTGF）mRNA的表达;免疫组化法检测肾组织中AT1R蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠的24 h U-pro、Scr、BUN、Cys-C水平显著升高（P <0.01）,血清、肾组织匀浆中的AngⅡ含量明显增加（P <0.01）,肾组织中的AngⅡ、AT1R、CTGF mRNA表达均明显上调（P <0.01）,AT1R、p-ERK1/2蛋白表达均明显上调（P <0.01）。与模型组比较,给药组大鼠的Scr、BUN、24 h U-pro及Cys-C水平均明显降低（P <0.05,P <0.01）,血清、肾组织中的AngⅡ含量均明显降低（P <0.05,P <0.01）,肾组织中的AngⅡ、AT1R、CTGF mRNA表达均明显下调（P <0.05,P <0.01）,AT1R、p-ERK1/2蛋白表达均明显下调（P <0.05,P <0.01）。结论三七总皂苷可改善CRF模型大鼠的肾功能和肾脏的病理学改变,其机制可能与调控AngⅡ/AT1R/ERK1/2信号通路有关。

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