文章目录

材料与方法

1 材料

2 实验方法

    2.1 以缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)法检测胎盘滋养细胞凋亡情况[3]

    2.2 细胞培养[2]

    2.3 细胞转染与分组[4]

    2.4 以荧光定量-PCR法检测circRBM39基因的表达[2]

    2.5 以蛋白质印迹法检测Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2和Bax蛋白的表达[5]

3 统计学处理

结 果

1 PE胎盘组织凋亡情况

2 缺氧对胎盘滋养细胞的Caspase-3、Bcl-2和Bax表达的影响

3 胎盘滋养细胞circRBM39基因表达水平

4 干扰circRBM39抑制缺氧诱导的胎盘滋养细胞凋亡

讨 论

文章摘要:目的探讨环状RNA-RBM39（circRBM39）在缺氧致胎盘滋养细胞凋亡中的作用及其分子机制。方法以缺口末端标记法检测子痫前期（PE）患者胎盘滋养细胞凋亡情况。体外培养人源胎盘滋养细胞株（HTR8-S/Vneo）,将其分为3组:第1转染组（空白对照）、第2转染组（转染5μL小干扰RNA阴性对照）和第3转染组（转染5μL circRBM39小干扰RNA）,浓度均为20μmol·L^-1,于1%O₂缺氧培养箱中培养48 h。通过蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、胱天蛋白酶-9（Caspase-9）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白的表达。结果 PE患者与健康妊娠孕妇比较,胎盘组织凋亡明显增加。第1转染组、第2转染组和第3转染组的Caspase-3蛋白表达量分别为0.49±0.10,0.53±0.07,0.19±0.04;Caspase-9蛋白表达量分别为0.58±0.09,0.61±0.07和0.36±0.05;Bcl-2蛋白表达量分别为1.67±0.18,1.79±0.17和2.78±0.25;Bax蛋白表达量分别为3.07±0.20,3.11±0.18和2.30±0.21。第3转染组与第1转染组和第2转染组比较,上述指标差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论下调circRBM39可抑制缺氧诱导的胎盘滋养细胞凋亡。

文章关键词:子痫前期,环状RNA,环状RNA-RBM39,胎盘滋养细胞,凋亡,缺氧,

项目基金:国家自然科学基金资助项目(81760270),宁夏自然科学基金重点基金资助项目(2020AAC02038;2020AAC03380),宁夏回族自治区重点研发计划重大基金资助项目(2019BFG02004,

论文作者:殷荷¹ 吴琪瑞¹ 高丽娜¹ 张玉月¹ 王艳华² 吴凯³ 

作者单位:1. 宁夏医科大学临床医学院 2. 宁夏医科大学总医院妇产科 3. 宁夏医科大学基础医学院 

论文DOI: 10.13699/j.cnki.1001-6821.2021.16.020

论文分类号: R714.244